Koerte katku testribad aitavad teil mõista
Nov 28, 2020
Koerte katku tuvastamise testpaber kuulub lemmikloomade antigeenide testimispaberisse, mis kasutab peamiselt topeltantikehade kihi meetodit immunokuldkromatograafia tehnoloogiat.
Lemmikloomade antigeenide testimise paberil kasutatakse üldiselt topeltantikehadega immunokuldkromatograafia tehnoloogiat, mis on üheetapiline tahkefaasiline membraanireaktsioon. Pärast testpaberi tilgutamist proovilahusesse roomab lahuses olev antigeen koos lahusega sidumispadjale ja reageerib selles oleva kolloidse kullaga -märgistatud antikehaga 1, moodustades punase antigeeni-antikehakompleksi, ning jätkab seejärel kromatograafiat, et edasi liikuda. Vaatlusakna tuvastusjoonel (T) püütakse punase immuunkompleksi antigeen kinni ja peatatakse siin eelnevalt-kaetud antikehaga 2. Punase kompleksi katkestamise suurenedes moodustub järk-järgult punane joon, nii et vastavalt punasele T-joonele saab olemasolu määrata, et proovilahus on positiivne. Kui proovis ei ole antigeeni, ei moodustu immuunantigeen{10}}antikehade kompleksi ja see voolab läbi T-ala ilma kinnijäämise ja kinnijäämiseta ning T-ala jääb valgeks, mida hinnatakse negatiivseks.
Koerte katku viiruse tuvastamiseks tuleks võtta katseproovidena koera nina, silmade sekretsioon, sülg, seerum ja pärakunäärmete sekretsioon.
Pärast testpaberikaardi alumiiniumfooliumkotist väljavõtmist tuleb see asetada tasaselt lauale ja pipeti abil imeda proovilahus prooviauku ja lisada tilkhaaval 3–4 tilka. Reaktsioon lõppeb tavaliselt 5-20 minuti jooksul.
Kui väljaheiteproov on hägune, võib see blokeerida proovivoolu prooviaugus. Kui mõne seerumi viskoossus on liiga kõrge, on kromatograafia vool aeglane. Sel juhul lisage 1-2 tilka lahjendit, et soodustada proovi sujuvat voolamist. Tagamaks, et punane lahus ronib üles ja voolab sujuvalt läbi reaktsioonimembraani.
Pärast väljaheiteproovi võtmist segage see põhjalikult lahjendiga, laske 1 minut seista ja seejärel võtke supernatant. Pange tähele, et proovivõtulahus ei tohiks sisaldada väljaheiteid ega hõljuvaid lisandeid, see blokeerib prooviaugu poorid, lahust on raske läbistada ja lahus ei saa vaatlusaknas mööda reaktsioonimembraani üles ronida ning kromatograafia voolab reaktsioonimembraani vastasküljele, kuni membraani pind muutus punasest valgeks ja reaktsioonijoon ilmus selgelt. Seetõttu ei saa reaktsioon kulgeda sujuvalt ja võib tekkida valge tahvli nähtus.
Enne proovide lisamist tuleb reaktsiooniproov ja lahjendi põhjalikult segada.
Lisage proovivedelikku tilkhaaval (intervall 2 sekundit), 3-4 tilka, kuni kuvaaknast voolab välja punane vedelik.
Kui pärast 3-4 tilga proovi lisamist 30 sekundi jooksul punast lahust vaatlusakna serva ei ilmu, lisage vastavalt vajadusele 2 tilka.
Et vältida lahuse ülevoolu nähtust ja mõjutada reaktsioonisignaali, ei ole soovitatav reaktsiooni hästi korraga täita.
Lemmiklooma antigeeni tuvastamise testipaber kasutab üldiselt antikehade võileiva meetodit. Sandwich-testi paberi reaktsioonitulemuste tõlgendamine on järgmine:
Positiivne: kvaliteedikontrolli joonel (C) ja testjoonel (T) on lillad{0}}punased triibud, mida hinnatakse positiivseks;
Negatiivne: kvaliteedikontrolli joonel (C) ilmub lilla-punane riba ja testjoonel (T) lillat-punast riba ei kuvata, see loetakse negatiivseks;
Kehtetu: kvaliteedikontrolli joonel (C) pole punast riba, olenemata sellest, kas T-joonel on punane riba, loetakse testriba kehtetuks.

